蛋白層析柱主要是根據(jù)要分離的植物有效成份(多糖類,皂苷類,黃酮類,生物堿等)、化工中間體(氨基酸,蛋白質,核酸,抗生素,維生素等)、活性物質等物質與層析柱內的不同填料(ODS填料、大孔樹脂、離子交換填料、分子篩填料、親和填料、凝膠填料,硅膠,纖維類等填料):樣品在不同的親和度,在不同濃度的酸堿液下,在不同的極性溶液下,在不同的壓力和流速下有層次的分開不同類別或不同成份,而得到計劃有效組份或成分。該層析柱可以接蠕動泵、也可以接AKTA儀器使用,簡單方便、密封性好!
蛋白層析柱的工作原理
1.預處理:在吸附樹脂的生產(chǎn)過程中,一般采用的是工業(yè)級原料,產(chǎn)品沒有經(jīng)過進一步純化處理,樹脂內部殘留少量單體,所以在使用之前,需用水溶性溶劑對其浸泡處理,然后用去離子水通過樹脂層,置換出水溶性溶劑離子方可投入使用。
2.逆流洗柱:用水洗出去水離子及破碎填料,樹脂裝入后,用蒸餾水反洗樹脂層,直至出水清晰、無氣味、無細碎樹脂為止。再依次用酸堿等浸泡、沖洗樹脂層,至出水呈中性為止。
3.水洗:水洗的主要目的是除去層析柱上所附著的渣滓。
4.吸附:吸附操作自上而下(或自下而上)通液,可采用不同流速,以選取*條件。流出液每隔一段時間取樣檢測,達泄漏點停止吸附,或多柱串聯(lián)達飽和后解吸。吸附主要是吸取料液中的渣滓或要回收物,該過程應控制料液的速度及吸附量,大孔樹脂應*浸泡在料液里,以提高吸附效果和運行穩(wěn)定性。
5.解吸、再生:解吸操作自上而下(或自下而上)通解吸劑,單柱吸附時,解吸與吸附操作對流為佳。解吸劑沸點要低以便回收處理。
蛋白層析柱的特性
1.耐高壓:允許實驗過程中使用較高的流速,加快實驗進程以及適合硬基質的色譜填料。
2.防爆性:可以選擇外貼防爆膜,防止玻璃管子爆裂,對人員造成傷害
3.可重復:一根柱管可多次使用,大大節(jié)約了您的成本。
4.可見性:分離帶顏色復雜天然產(chǎn)物,您可以直觀的看到分離色帶
5.篩板:可以提供各種粒徑的篩板,優(yōu)良的分配效果,達到更好的分離度